暗視野金相顯微鏡的基本工作原理是怎樣的呢？還有它的使用方法跟普通的光學(xué)顯微鏡又有什么不一樣呢？其保養(yǎng)方法是怎樣的？在使用暗視野顯微鏡的時(shí)候有哪些注意事項(xiàng)呢？

基本原理：暗視野金相顯微鏡的構(gòu)造主要是采用一種特殊的聚光器，在聚光器的下方中央為圓形黑盤所遮，光僅由周緣進(jìn)入，使光會(huì)聚于載玻片上，并斜照物體，物體經(jīng)斜射照明后，發(fā)出反射光可進(jìn)入物鏡，這樣，造成顯微鏡視野黑暗，而其中的物體明亮。如無暗視野顯微鏡時(shí)，只需將明視野顯微鏡上的聚光器取下，換上暗視野聚光器即可；也可在明視野顯微鏡聚光鏡頭上附一中央遮光板(黑色的X光片包裝紙，用剪刀剪成直徑小于聚光鏡直徑大約0.8-1cm，用少許鏡油輕輕粘附于聚光鏡頭上，使光源的光線能從周圍透過即可應(yīng)用)。暗視野金相顯微鏡的使用方法：1) 把暗視野聚光器裝在顯微鏡的聚光器支架上。2) 選用強(qiáng)的光源，但又要防止直射光線進(jìn)入物鏡，所以一般用顯微鏡燈照明。3) 在聚光器和標(biāo)本片之間要加一滴香柏油，目的是不使照明光線于聚光鏡上面進(jìn)行全反射，達(dá)不到被檢物體，而得不到暗視野照明。4) 升降集光器，將集光鏡的焦點(diǎn)對(duì)準(zhǔn)被檢物體，即以圓錐光束的頂點(diǎn)照射被檢物。如果聚光器能水平移動(dòng)并附有中心調(diào)節(jié)裝置，則應(yīng)首先進(jìn)行中心調(diào)節(jié)，使聚光器的光軸與顯微鏡的光軸嚴(yán)格位于一直線上。5) 選用與聚光器相應(yīng)的物鏡，調(diào)節(jié)焦距，找到所需觀 察的物像。

暗視野金相顯微鏡的保養(yǎng)：1. 嚴(yán)格按照有關(guān)操作規(guī)則使用顯微鏡，避免因使用不當(dāng)造成損毀。2. 顯微鏡在儲(chǔ)存和使用過程中，普遍存在著生霉起霧問題，霉和霧會(huì)使顯微鏡的視場(chǎng)模糊，分辯率下降。為了使顯微鏡保持良好的工作狀態(tài)，延長使用壽命，顯微鏡的工作環(huán)境應(yīng)保持清潔、干燥、防塵。3. 顯微鏡在每次使用完畢后應(yīng)及時(shí)做好清潔工作，特別是目鏡、物鏡等容易污染的光學(xué)部件，如發(fā)現(xiàn)表現(xiàn)表面有灰塵、指紋、臟物等，應(yīng)及時(shí)用鏡頭紙清潔干凈。4. 顯微鏡工作室zui好能安裝空調(diào)、抽濕及防塵裝置。5. 如發(fā)現(xiàn)光學(xué)部件內(nèi)部有生霉等現(xiàn)象，zui好及時(shí)聯(lián)系有關(guān)廠家派人清潔、維修。注意事項(xiàng)： A．進(jìn)行暗視野觀察時(shí)，聚光鏡與載玻片之間滴加的香柏油要充滿，否則照明光線于聚光鏡上面進(jìn)行全 面反射，達(dá)不到被檢物體，從而不能得到暗視野照明。 B．在進(jìn)行暗視野觀察標(biāo)本前，一定要進(jìn)行聚光鏡的中心調(diào)節(jié)和調(diào)焦，使焦點(diǎn)與被檢物體一致。C．由于暗視野聚光鏡的數(shù)值孔徑都較大（ NA=1．2—1．4），焦點(diǎn)較淺，因此，過厚被檢物體無法調(diào)在聚光鏡焦點(diǎn)處，一般載玻片厚度為1．0mm左右，蓋玻片厚度宜在0．16mm以下，同時(shí)載玻片、蓋玻片應(yīng)很清潔，無油脂及劃痕，否則都會(huì)嚴(yán)重地?cái)_亂zui終的像。

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