共聚焦顯微鏡是基于傳統(tǒng)顯微鏡進行研發(fā)的衍生產(chǎn)品,其告別傳統(tǒng)顯微鏡進行成像時深度分辨率較差,而使用共聚焦顯微鏡可以對樣品某一層進行成像,具有較高的深度分辨率,進而可以對樣本進行三維成像。下面我們就其原理、功能、應(yīng)用進行詳細(xì)介紹。
在1957年,Marvin Minsky就提出此初期原理,使得不斷研發(fā)后,共聚焦顯微鏡可以對某一區(qū)域的生物組織樣本進行圖像顯示,并通過不斷調(diào)節(jié)Z軸深度,對一定Z軸深度范圍內(nèi)的生物組織進行成像,并通過疊加各個深度的二位成像,得到該區(qū)域生物組織的三維圖像重構(gòu)圖。
共聚焦激光掃描顯微鏡在原理上主要通過引入小孔,使得顯微鏡具有深度分辨率,成像質(zhì)量增加。并且通過對體樣本進行斷層步進成像,通過后期圖像處理可以得到體樣本三維立體成像。因此從細(xì)胞生物學(xué)和遺傳學(xué)到微生物學(xué)和發(fā)育生物學(xué),CLSM廣泛用于眾多生物科學(xué)學(xué)科。它也用于量子光學(xué)、納米晶體成像和光譜學(xué)都有使用。
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